光线通过通明物体如活细菌细胞后
，由于受通明物体中密度和折射率分歧的物质的影响
，部门光线造成了绕射光
，光波的相位产生变动
，而这种相位差不阐发为明暗和色彩上的差距
，不能在显微镜视野中观察到。相差显微镜就是将经过通明物体的直射光延长或提前
，并和绕射光产生过问
，使相位差变为振幅差。若是产生的过问为相长过问(图Ⅲ-8
，R组光线)
，则振幅的同相量相加而变大
，我们便看到较亮的部门;若是所产生的过问为相消过问时(如图Ⅲ-8
，S组光线)
，则振幅异相量相消而变幼
，这部门就变得较暗。这样
，变相位差为振幅差的了局
，使原来通明的物体阐发出显著的明暗差距
，对比度增长
，能更清澈地观察活细胞的轻微结构。